Пятница, 05.03.2021, 23:21
Вітаю Вас Гость | Реєстрація | Вхід

і

Архив статей

Головна » Файли » 2012 » 4 (112)

Малишева С.В., Білько Н.М., Білько Д.І., Сарич Т. Диференційний потенціал отриманих за допомогою системи транспозонів індукованих плюріпотен
08.06.2014, 13:03

Резюме
Малишева С.В., Білько Н.М., Білько Д.І., Сарич Т. Диференційний потенціал отриманих за допомогою системи транспозонів індукованих плюріпотентних стовбурових клітин миші.
У роботі досліджено диференційний потенціал клонів, отриманий за допомогою системи транспозонів лінії індукованих плюріпотентних стовбурових клітин миші. Показано, що отримані експериментальні клони здатні формувати у суспензійній культурі ембріоїдні тільця (ЕТ), що за кількістю і

розміром співставні із ЕТ, сформованими контрольними лініями плюріпотентних клітин. Появу попередників різних зародкових шарів оцінювали за експресією ранніх диференційних маркерів при спонтанному диференціюванні досліджуваних клонів у системі in vitro. Також досліджено диференційний потенціал отриманих клонів in vivo. Показано, що досліджувані клони можуть формувати тератоми у імунодифіцитних тварин. Отримані дані свідчать про плюріпотентність досліджуваних клітинних ліній.
Ключові слова: індуковані плюріпотентні стовбурві клітини, спонтанне диференціювання, маркери плюріпотентності, диференційні маркери.

 

Резюме
Малишева С.В., Билько Н.М., Билько Д.И., Сарич Т. Дифференциальный потенциал полученных посредством системы транспозонов индуцированных плюрипотентных стволовых клеток мыши.
В данной работе исследован дифференционный потенциал клонов индуцированных плюрипотентных стволовых клеток мыши, полученных с помощью системы транспозонов. Показано, что полученные экспериментальные клоны способны формировать в суспензионной культуре эмбриоидные тельца (ЭТ), сопоставимые по размеру и количеству с ЭТ, сформированными контрольными линиями плюрипотентных клеток. Появление предшественников разных зародышевых листков оценивали по экспрессии ранних дифференционных маркеров при спонтанном дифференциировании исследуемых клонов в системе in vitro. Так же исследован дифференционный потенциал полученных клонов в системе in vivo. Показано, что исследуемые клоны могут формировать тератомы у имунодифицитных животных. Полученные данные свидетельствуют о плюрипотентности исследуемых клеточных линий.
Ключевые слова: индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, спонтанная дифференцировка, маркеры плюрипотентности, дифференционные маркеры.

 

Summary
Malisheva S.V., Bilko N.M., Bilko D.I., Sarich T. Differential potential of induced pluripotent stem cells of mouse, obtained with mobile elements as gene delivery system.
Differentiation potential of various clones of murine iPSCs, obtained with a principally new tool - mobile elements as gene delivery system, is studied in the current paper. The experimental clones were shown to form embryoid bodies (EBs), comparable by the size and quantity with EBs, formed by established cell lines. The appearance ob different germ layers' progenitor cells was estimated by the expression of early differentiation markers during spontaneous differentiation in vitro. In vivo differentiation potential was studied also. It is demonstrated that the experimental clones were able to form vascularized teratomas in immunodeficient anomals. The data obtained proves the pluripotency of the clones tested.
Key words: induced pluripotent stem cells, spontaneous differentiation, pluripotency markers, differentiation markers.

Рецензент: д.біол.н., проф.С.М.Смірнов

 

УДК 599.323.4:591.1

Национальный университет "Киево-Могилянская академия" ​​(Киев)

Національний університет "Києво-Могилянська академія" (Київ)

Centre of Molecular and Cell Research, National University of “Kyiv-Mohyla Academy”

l.pylyp@ivf.com.ua, nbilko@ukma.kiev.ua

Інститут нейрофізіології Кельнського університету (Кельн, Німеччина)

Література
1. EOS lentiviral vector selection system for human induced pluripotent stem cells / A. Hotta, A. Y L Cheung, N. Farra [et al.] // Nature Protocols. - 2009. - Vol. 4 (12). - P. 1828-1844.
2. Iwamuro M. Comparative analysis of endoderm formation efficiency between mouse ES cells and iPS cells / M. Iwamuro, T. Komaki, Y. Kubota [et al.] // Cell. Transplant. - 2010. - Vol. 19(6). - P. 831-9.
3. Keller G. Embryonic stem cell differentiation: emergence of a new era in biology and medicine / G. Keller // Genes Dev. - 2005. - Vol. 19(10). - P. 1129-55.
4. Krohne T.U. Generation of retinal pigment epithelial cells from small molecules and OCT4-reprogrammed human induced pluripotent stem cells / T. U. Krohne, P. D. Westenskow, T. Kurihara [et al.]// PaediatrInt Child Health. - 2012. - Vol. 1(2). - P. 96-109.
5. MacArthur C. C. Generation of human-induced pluripotent stem cells by a nonintegrating RNA sendai virus vector in feeder-free or xeno-free conditions / C. C. MacArthur, A. Fontes, N. Ravinder [et al.] // Stem Cells Int. - 2012. - Vol. 2012 (2012). - Article ID 564612. - Doi:10.1155/2012/564612.
6. Mochiduki Y. Methods for iPS cell generation for basic research and clinical applications / Y. Mochiduki, K. Okita // Biotechnol. J. - 2012. - DOI: 10.1002/biot.201100356.

. Nemajerova A. Two-factor reprogramming of somatic cells to pluripotent stem cells reveals partial functional redundancy of Sox2 and Klf4 / A. Nemajerova, S. Y. Kim, O. Petrenko, U. M. Moll // Cell Death Differ. - 2012. - Doi: 10.1038/cdd.2012.45.
8. Okada M. Effective culture conditions for the induction of pluripotent stem cells / M. Okada, M. Oka, Y. Yoneda// BiochimBiophysActa. - 2010. - Vol. 1800(9). - P. 956-63.
9. Plews J. R. Activation of pluripotency genes in human fibroblast cells by a novel mRNA based approach / J. R. Plews, J. Li, M. Jones [et al.]// PLoS One. - 2010. - Vol. 5 (12). - P. 14397.
10. Seiler K. Induced Pluripotent Stem Cells Expressing Elevated Levels of Sox-2, Oct-4, and Klf-4 Are Severely Reduced in Their Differentiation from Mesodermal to Hematopoietic Progenitor Cells / K. Seiler, M. S. Noghabi, K. Karjalainen [et al.]// Stem Cells Dev. - 2011. - Vol. 20(7). - P, 1131-1142.
11. Si-Tayeb K. Generation of human induced pluripotent stem cells by simple transient transfection of plasmid DNA encoding reprogramming factors / K. Si-Tayeb, F. K Noto, A. Sepac [et al.] // BMC Developmental Biology. - 2010. - Vol. 10. - P. 81.
12. Swierczek M. The Sleeping Beauty transposon system for clinical applications / M. Swierczek, Z. Izsvak, Z. Ivics // Expert OpinBiolTher. - 2012. - Vol. 12 (2). - P. 139-153.
13. Takahashi K. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors / K.Taka-hashi, S.Yamanaka// Cell. - 2006. - Vol. 126 (4). - P. 663-676.
14. Tashiro K. Efficient adipocyte and osteoblast differentiation from mouse induced pluripotent stem cells by adenoviral transduction / K. Tashiro, M. Inamura, K. Kawabata [et al.] // Stem Cells. - 2009. - Vol. 27. - P. 1802-1811.
15. Zhang H. Reprogramming of somatic cells via TAT-mediated protein transduction of recombinant factors / H. Zhang, Y. Ma, J. Gu [et al.] // Biomaterials. - 2012. - Vol. 33 (20). - P. 5047-5055.

 


 

Категорія: 4 (112) | Додав: dok
Переглядів: 459 | Завантажень: 0 | Рейтинг: 0.0/0
Всього коментарів: 0
Додавати коментарі можуть лише зареєстровані користувачі.
[ Реєстрація | Вхід ]
RSS

Форма входу

Категорії розділу

1 (109) [43]2 (110) [55]
3 (111) [45]4 (112) [52]
5 (113) [76]6 (114) [83]

ПОИСК

НАШ ОПРОС

Оцените наш сайт
Всего ответов: 46

ДРУЗЬЯ САЙТА

Статистика


Онлайн всего: 1
Гостей: 1
Пользователей: 0