Резюме
Бондаренко Н.Ю. Кількісне визначення пірокатехіну та елагової кислоти хемілюмінесцентним методом.
Стаття присвячена порівняльному вивченню інгібіторного впливу пірокатехіну (ПК) та елагової кислоти (ЕК) на хемілюмінесцентну реакцію окиснення люмінолу гідроген пероксидом в присутності Hb. З’ясовано умови та розроблена методика кількісного визначення вмісту ПК та ЕК в модельних розчинах субстанції кінетичним методом інгібування хемілюмінесценції. При визначенні ПК та ЕК у модельних розчинах субстанції RSD = 0,8% (n = 5, P = 0,95), нижня межа визначуваних концентрацій ПК та ЕК сн становить 1,2·10-6 моль/л та 4·10-8 моль/л відповідно.
Ключові слова: люмінол, гемоглобін, пірокатехін, кислота елагова, хемілюмінесцентний метод.
Резюме
Бондаренко Н.Ю. Кількісне визначення пірокатехіну та елагової кислоти хемілюмінесцентним методом.
Статья посвящена сравнительну изучению ингибиторного влияния пирокатехина и элаговой кислоты на хемилюминесцентную реакцию окисления люминола пероксидом водорода в присутвии Hb. Выяснены условия и разработана методика количественного определения содержания пирокатехина и элаговой кислоты в модельных растворах субстанции кинетическим методом ингибирования хемилюминесценции. При определении пирокатехина и элаговой кислоты в модельных растворах субстанции RSD = 0,8% (n = 5, P = 0,95), нижняя граница определяемых концентрацій пирокатехина и элаговой кислоты, сн,  составляет 1,2·10-6 моль/л та 4·10-8 моль/л соответственно.
Ключові слова: люминол, гемоглобин, пирокатехин, кислота эллаговая, хемилюминесцентный метод.
Summary
Bondarenko N.Yu. Quantitative determination of pyrocatechol and ellagic acid by chemiluminescence method.
The article is devoted to the comparative study of inhibition influence of the pyrocatechol and ellagic acid on the chemiluminescent reaction of luminol oxidation by hydrogen peroxide in the presence of haemoglobin (Hb). Terms are found and methodology of quantitative determination of the pyrocatechol and ellagic acid content in model solutions of substance by the kinetic method of inhibition of chemiluminescence is developed. At determination of the pyrocatechol and elagic acid in model solutions of substance of RSD = 0,8 %(n = 5, P = 0,95), LOG of the pyrocatechol and ellagic acid is 1,2-10-6 mol/l  and 4-10-8 mol/l  accordingly.
Key words: luminol, haemoglobin, pyrocatechol, ellagic acid, chemilumіnescence method.

Рецензент: д.ф.н., проф. С.І. Мерзлікін

УДК 615.25:54.062

Національний фармацевтичний університет (Харків)

Национальный фармацевтический университет (Харьков)

National University of Pharmacy (Kharkov)

88yuyu@mail.ru

Polyphenolic compounds of plant origin, such as pyrocatechin (PC) and ellagic acid (EA) belong to a group of hydrolyzed tannins. They have different pharmacological activities, namely, antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, cardioprotective, antiulcer and others. Antioxidant effect of PC and EA is determined by their chemical structure . Due to the moving atoms in a molecule of hydrogen, polyphenolic compounds neutralize free radicals and form relatively stable semichinones. These pharmacological properties of EA can be explained by the peculiarities of its chemical structure - a large number of OH groups, which are able to bind free radicals to form semichinone complexes of ferric ions, reduce free ferric ions and thus stabilize the process of lipid peroxidation.

At present the scientific literature describes methods of quantification of PC and EA using different methods. Basically, the quantification of PC and EA is carried out using HPLC, by spectrophotometry in the UV wavelength, as well as other physico-chemical methods of quantitative analysis.

The aim of recent work is a comparative study of the antioxidant properties of PC and EA by the effect of chemiluminescence (CL) inhibition of analytic system H₂L-H₂O₂-Hb.

Results and Discussion

In the result of the performed research work it was obtained that the optimum for the chemiluminescence inhibition in the system H₂L-H₂O₂- Hb is the order of mixing, when the solution of Hb is added latter. Optimal concentrations of reagents for PC and EA are: c (H₂L) = ( 1 - 2 ) • 10^-4 mol L^-1 , c (NaOH) = 0.05 mol L^-1, c (H₂O₂) = 0.0375 mol L^-1 , c (Hb) = 3.75 • 10^-2 mg mL^-1.

In the result of the present work new procedures for the quantitative determination of PC and EA in substance model solutions by the effect of lyuminolovoyi reaction chemiluminescence inhibition were developed. The relative standard deviation does not exceed ± 0.8% with the accuracy δ = 0.2% ... 0%. The LOD for concentrations of PC and EA is respectively 1.2•10^-6 mol L^-1 and 4•10^-8 mol L^-1.

Conclusions

1. In a comparative aspect inhibitory effect of PC and EA to chemiluminescent oxidation of luminol hydrogen peroxide in the presence of Hb was studied: EA shows a stronger inhibitory activity.

2. The method of quantitative determination of PC and EA in substances model solutions of by kinetic chemiluminescence inhibition in the system H₂L - H₂O₂ - Hb was proposed. While PC and EA determination in substance model solutions RSD = 0.8% (n = 5 , P = 0.95), the LOD for concentrations of PC and EA was 1.2 • 10^-6 and 4 • 10^-8 mol L^-1, respectively .

Література

1. Малиновська С.А. Порівняльне вивчення фізико-хімічних властивостей елагової кислоти та альтану / С.А. Малиновська, Є.В. Гладух, О.І. Зайцев // Фармац. журнал. – 2005. ‑ № 2. – С. 80–82.
2. Пат. 2205398 Россия. Способ определения гидрохинона и пирокатехина в водных растворах; МПК 7G 01 N 30/02 / Л. А.Харитонова, Я. И.Коренман, О. Б.Рудаков. ‑ № 20011356 96/28; Заявл. 24.12.2001; Опубл. 27.05.2003.
3. Пеннер Н.А. Применение сверхсшитого полистирола для определения пирокатехина, резорцина и гидрохинона методом ОФ ВЭЖХ с предварительным динамическим концентрированием на потоке / Н.А. Пеннер, П.Н. Нестеренко, М.А. Рыбалко // Журн. анал. химии. – 2001. – Т. 56, № 10. – С. 1067–1072.
4. Подолина Е.А. Электроаналитическое определение п-крезола и пирокатехина в водах / Е.А. Подолина, Л.А. Харитонова, Я.И. Коренман // Вестн. Воронеж. гос. технол. акад. – 2000. – № 3. – С. 165–166.
5. Сербин А.Г. Альтан – новое отечественное эффективное средство ранозаживляющего, противовоспалительного, антимикробного действия / А.Г. Сербин, Л.В. Яковлева, О.П. Хворост // Провизор. – 1998. ‑ № 18. – С. 40–41.
6. Харитонова Л.А. Экстракционно-кондуктометрическое определение пирокатехина в сточных водах / Л.А. Харитонова // Материалы 41 Отчетной научной конференции за 2002 г.: тез. доп. ‑ Воронеж, 2002. – С. 183.
7. Яковлева Л.В. Защитное действие эллаговой кислоты при экспериментальном миокардите / Л.В. Яковлева, А.К. Ивахненко, Н.Д. Бунятян // Эксперим. и клин. фармакология. – 1998. – Т. 61, № 3. – С. 32‑34.
8. Hao Xue-Zhi. Определение содержания пирокатехина в соединениях, экстрагируемых из корней red sage astraolus методом ВЭЖХ / Hao Xue-Zhi, Liu Chen, Wang Xin-yan // Harbin Univ. Commer. Natur. Sci. Ed. – 2002. – Vol. 18, № 3. – Р. 253–254.
9. Analytical methods for assay of ellagic acid and its solubility studies / I. Bala, V. Bhardwaj, S. Hariharan [et al.] // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. – 2006. – Vol. 40. – P. 206-210.
10. Li Zhong. Определение фенола и пирокатехина в табачных листьях твердофазной экстракцией и ВЭЖХ / Li Zhong, Wang Lan, Yang Guangyu // Anal. Chem. – 2001. – Vol. 29, № 12. – Р. 1409–1411.
11. Liu Jianhua. Одновременное определение фенола, катехина и хинола в смесях методом спектрофотометрии с двойным фильтрованием посредством преобразования Фурье и использованием второй производной отношения спектров / Liu Jianhua, Lin Zhenyu // Spectrosc. and Spectral Anal. – 2000. – Vol. 20, № 4. – Р. 480–483.
12. Sun Wei. Application of carbon ionic liquid electrode for the electrooxidative determination of catehol / Sun Wei, Li Yinzhuo, Yang Maoxia [et al.] // Sens. and Actuators. B. – 2008. – Vol. 133, № 2. – P. 387‑392.
13. Wilson C. Thomas. Quantitative determination of ellagic acid / Thomas C. Wilson, Ann E. Hagerman // J. Agric. Food Chem. ‑ 1990. – Vol. 38. – P. 1678‑1683.
14. Wang Liang. Covalent modification of glassy carbon electrode with aspartic acid for simultaneous determination of hydroquinone and catechol / Wang Liang, Huang Peng-fei, Wang Hong-jing [et al.] // Ann. chim. – 2007. – Vol. 97, № 5‑6. – Р. 295‑404.
15. Yang Shaoming. Horseradish peroxidaze biosensor based on layer technique for the determination of phenolic compounds / Yang Shaoming, Li Yangmei, Jiang Xiuming [et al.] // Sens. and Actuators. B. – 2006. – Vol. 114, № 2. – Р. 774–780.