Резюме
Блажеєвський М.Є., Криськів Л.С. Кінетико-спектрофотометричне визначення арпеналу за реакцією пер гідролізу.
Опрацьована методика та показана можливість здійснення кількісного визначення арпеналу (АП) у модельних розчинах та у таблетках по 0,05 г кінетико-спектрофотометричним методом за індикаторною реакцією каталітичного окиснення п-фенетидину гідроген пероксидом при рН 8,5. Градуювальний графік на АП лінійний в межах 8,6∙10-2 – 6,8∙10-1 мг/мл. Межа виявлення (LOD) та кількісного визначення (LOQ) АП, становлять 2,5∙10-2 мг/мл та 7,6∙10-2 мг/мл відповідно. Для п’ятиразових визначень 0,3424, 0,428 і 0,5136 мг/мл АП RSD становить 1,91, 1,64 і 1,25% відповідно. Вміст основної речовини у таблетках «Арпенал» по 0,05 г становить 100,5±2,24%. Перевагами запропонованої методики є можливість визначення вмісту основної речовини схильного до гідролітичного розкладення АП в присутності продуктів його деструкції, а також простоту у виконанні та експресність (час одиничного аналізу не перевищує 10хв).
Ключові слова: арпенал, пергідроліз, спектрофотометрія, кількісне визначення.
Резюме
Блажеевский Н.Е., Крыськив Л.С. Кинетико-спектрофотометрическое определение арпенала по реакции пергидролиза.
Разработана методика и показана возможность осуществления количественного определения арпенала (АП) в модельных растворах и таблетках «Арпенал»по 0,05 г кинетико-спектрофотометрическим методом с использованием индикаторной реакции каталитического окисления п-фенетидина пероксидом водорода при рН 8,5. Градуировочный график на АП линейный в пределах 8,6∙10-2 – 6,8∙10-1 мг/мл. Предел обнаружения (LOD) и количественного определиня (LOQ) АП, составляет 2,5∙10-2 мг/мл и 7,6∙10-2 мг/мл соответственно. Для пятикратных определений 0,3424, 0,428 и 0,5136 мг/мл АП RSD = 1,91, 1,64 и 1,25% соответственно. Содержание основного вещества у таблетках «Арпенал» по 0,05 г составляет 100,5±2,24%. Преимуществами предложенной методики является возможность определения содержания основного вещества склонного к гидролитическому разложению АП в присутствии продуктов его деструкции, а также простоту в исполнении и экспрессность (время единичного анализа не превышает 10 мин).
Ключевые слова: арпенал, пергидролиз, спектрофотометрия, количественное определение.
Summary
Blazheyevskyy M.Ye., Kryskiw L.S. Arpenal kinetic spectrophotometric assay.
A kinetic spectrophotometric method has been developed for the determination of Arpenal (AP) using the indicator reaction of catalytic p-Phenetidine oxidation by hydrogen peroxide at pH 8,5 in model sоlutions and tablets “Arpenal” 0,05 g. Calibration graph for AP has linear dependence in the range 8,6∙10-2 – 6,8∙10-1 mg/mL with LOD and LOD of 2,5∙10-2 and 7,6∙10-2 mg/mL AP respectively. For five determinations of 0,3424, 0,428 and 0,5136 mg/mL AP the reproducibility has a RSD of 1,91, 1,64 and 1,25% respectively. AP tablets contains 100,5±2,24% of С21Н27NO2∙HCl. The proposed kinetic spectrophotometric method proved to be selective, simple and rapid (single analysis time does not exceed 10 min) for the quantitative determination of AP in the presence of it hydrolytic cleavage products.
Key words: arpenal, perhydrolysis, kinetic spectrophotometric determination, p-phenetidine.

Рецензент: д. фарм. н., доц. С.В. Колеснік

УДК 54.062:542.938.062:543.42.062

Національний фармацевтичний університет (Харків)

Национальный фармацевтический университет (Харьков)

National University of Pharmacy (Kharkov)

soul_fly@meta.ua

Arpenal (AP), 3-(diethylamino)propil diphenylacetic acid hydrochloride is a m- and n- acetylcholine receptor antagonist. It has peripheral and moderate central cholinolytic effect and myotropic properties. AP used in the treatment of gastric and duodenal ulcer, liver and renal colic. Also known it application as a prophylactic pretreatment for nerve gas and pesticide poisons. The scientific literature describes nonaqueous acidimetry, argentometry, alkalimetry, extraction photometry with bromophenol blue, brilliant green, thallium (III) bromide acidocomplexes and other methods for AP assay.

We propose a new kinetic spectrophotometric method of quantitative determination of AP using the indicator reaction of catalytic p-Ph oxidation by hydrogen peroxide. It is based on the system of two coupled reaction: AP perhydrolysis (reaction with excess of Н₂О₂ in a weak alkaline medium with diphenyl acetic acid (DAA) formation) and following p-phenetidine (p-Ph) oxidation by newly generate DAA to azodue (λ_max = 358 nm). Its increasing absorbance allows to determine AP. Kinetic spectrophotometric initial rate method was used for computing. Potential hydrolytic cleavage products under these conditions of the reaction do not interfere the determination of AP.

Optimal conditions for AP perhydrolysis and thus for indicator reaction was determined, including order of mixing, reagent concentration and pH. In the pH range 8,2 – 8,5 rate of 4,4'-azoxyphenetol formation directly proportional to the concentration of AP. It is shown experimentally that the perhydrolysis reaction is the limitative stage of p-Ph oxidation in p-Ph – Н₂О₂ – AP system. Stated kinetic feature of the passing reactions and sufficiently high selectivity of indicator reaction of p-Ph oxidation by newly generate DAA in the presence of relatively large excess of Н₂О₂ is the basis of developed selective kinetic spectrophotometric tangent method of quantitative assay of AP in model solutions and dosage form “Arpenal” 0,05.

Kinetic curve of 4.4'-azoxyphenetol accumulation in p-Ph – Н₂О₂ – AP system under optimized reaction conditions was obtained. Sites from 1 to 7 min has linear dependence and specify initial reaction rate (A vs. τ dependence tangent angle). The Beer’s law was verified from the calibration curve by plotting a graph of concentration vs. increasing of absorbance from the series of AP concentrations ranging from 8,6∙10^-2 – 6,8∙10^-1 mg L^-3. The optical characteristics and the analytical data of the calibration curve are summarized in Table 1.

Table 1: Optical characteristics and regression output

^* tgα = b С + a, where С is the concentration of analyte, mg L^-3, and tgα is the initial reaction conditional rate, min ^-1.

Thus, a highly selective and sensitive kinetic spectrophotometric method has been developed for the determination of AP in dosage form “Arpenal” 0,05 using the indicator reaction of catalytic p-Ph oxidation by hydrogen peroxide. The proposed method proved to be selective, simple and rapid (single analysis time does not exceed 7 min) for the quantitative determination of AP in the presence of it hydrolytic cleavage products. For five determinations of AP 0,3424, 0,428 and 0,5136 mg/mL concentrations the reproducibility has a RSD of 1,91, 1,64 and 1,25% respectively. Dosage form “Arpenal” 0,05 recovery is 100,5±2,24% (n = 5, Р = 0,95) of AP.

Література

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Т. 1 / М.Д. Машковский. – М.: Новая Волна, 2002. – 540 с.  
2. Крыжановский C.А. Полный современный справочник лекарственных препаратов. Практическое руководство / C.А. Крыжановский, М.Б. Вититнова. – М.: РИПОЛ КЛАССИК, 2002. – 1216 с.
3. Пат. США 5298504A Nerve gas antidote / Holm Bleyer, Armin Sommer. – Режим доступу до патенту: http://www.google.com.mx/patents/US5298504
4. Туркевич М.М. Фармацевтична хімія / М.М. Туркевич. – К.: Вища школа, 1973. – 494 с.
5. El’Saĭed M.A. Extraction-photometric determination of spasmolytin and arpenal / M.A. El’Saĭed // Farmatsiia. – 1968. – V.17, № 3. – P. 72-76.
6. Антипкина Р.В. Унифицированный метод определения лекарственных препаратов группы аминоалкиловых эфиров арил-алифатических кислот / Р.В. Антипкина, Н.П. Карельцева, Г.И. Олешко // Фармация. – 1975. – № 2. – С. 43-47.
7. Бурмистрова Е.В. Количественное определение арпенала с ацидокомплексами металлов / Е.В. Бурмистрова, Р.В. Кириллова. – Перм. фарм. ин-т. – Пермь, 1986. – 10 с. – Деп. в ВИНИТИ 17.09.86, № 6692-В-86
8. Кириллова Р.В. Количественное определение апрофена и арпенала с тетрародано-(ІІ)-цинкатом аммония / Р.В. Кириллова, Е.В. Бурмистрова, Г.И. Кудымов // Контроль качества лекарств: информационо-методический бюлетень. – М., 1992. – № 2. – С. 35.
9. Даулетбакова Ф.Д. Использование ИК-спектросокопии для идентификации арпенала и ганглерона / Ф.Д. Даулетбакова, В.Ф. Крамаренко // Актуальные вопросы фармации: сб. науч. тр. – Алма-Ата, 1991. – С.49-51.
10. Еще раз о пределах обнаружения и определения / Л.П. Экспериандова, К.Н. Беликов, С.В. Химченко, Т.А. Бланк // ЖАХ. – 2010. – Т. 65, № 3. – С. 229–234.
11. Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». – [1-е вид. – Харків: РІРЕГ, 2001. – 556 с.
12. Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». – [1-е вид.]. – Доповнення 2. – Харків, 2008. – 620 с.