Резюме
Галкін О.Ю., Ніколаєнко І.В., Дуган О.М. Одержання та вивчення властивостей нових моноклональних антитіл до IgM людини.
Одержано оригінальний набір з 12 клонів гібридом, продуцентів моноклональних антитіл (МКАТ) до IgМ людини. Проведено поглиблене вивчення біологічних властивостей антитіл: встановлено їх специфічність, константу афінності та титр у культуральній рідині, а також здійснено порівняльну епітопну характеристику найактивніших МКАТ. Порівняно вивчена можливість використання отриманих МКАТ у складі імуноферментних тест-систем для виявлення IgM-антітіл до Toxoplasma gondii і до цитомегаловірусу людини.
Ключові слова: моноклональні антитіла, гібридоми, імуноглобуліни, діагностика, афінність, епітопне картування.
Резюме
Галкин А.Ю., Николаенко И.В., Дуган А.М. Получение и изучение свойств новых моноклональных антител к IgM человека.
Получен оригинальный набор из 12 клонов гибридом, продуцентов моноклональных антител (МКАТ) к IgМ человека. Проведено углубленное изучение биологических свойств антител: установлена их специфичность, константа афинности и титр, в культуральной жидкости, а также осуществлена сравнительная эпитопная характеристика МКАТ. Сравнительно изучена возможность использования полученных МКАТ в составе иммуноферментных тест-систем для выявления IgM-антител к Toxoplasma gondii и к цитомегаловирусу человека.
Ключевые слова: моноклональные антитела, гибридомы, диагностика, иммуноглобулины, диагностика, аффинность, эпитопное картирование.
Summary
Galkin O.Ju., Nikolaenko I.V., Dugan О.М. Obtaining and study of properties of new monoclonal antibodies against human IgM.
The original set from 12 clones of hybridomas, producers of monoclonal antibodies (МCAB) against human IgМ has been obtained. The study of biological properties of antibodies is conducted: their specificity, constant of affinity and titer in a cultural medium, and also comparative epitop description of more active MCABs has been carried out. The possibility of using of obtained МCAB as the part of ELISA tests systems for detection of IgМ-antibodies against Toxoplasma gondii and human cytomegalovirus has been rather studied.
Key words: monoclonal antibodies, hybridomas, diagnostics, immunoglobulines, diagnostics, affinity, epitop mapping.
УДК 577.27:57.083.33
Національний технічний університет України «Київський політехнічний інститут»
Национальный технический университет Украины "Киевский политехнический институт"
National Technical University of Ukraine "Kyiv Polytechnic Institute"
biotech@fbt.ntu-kpi.kiev.ua, alexfbt@mail.ru
Науково-виробнича компанія "Вітротест"
Література
1. Якобисяк М. Імунологія / М. Якобисяк ; пер. з польськ. за ред. проф. В.В.Чоп'як. - Вінниця: Нова книга, 2004. - 672 с.
2. Ройт А. Иммунология / А.Ройт, Дж.Бростофф, Д.Мейл. - М.: Мир, 2000. - 592 с.
3. Структура и функции антител / под ред. Л.Глин, М. Стьюард. ; пер. с англ. - М.: Мир, 1983. - 380 с.
4. Иммунология. Т.1 / под ред. У.Пола ; пер. с англ. - М.: Мир, 1987. - С. 204 - 254.
5. Материалы 1-ой международной научно-практической конференции "Специфическая диагностика инфекционных болезней" (20 - 21 января 2004 г., г. Киев) / под ред. Е.Г. Бочкарева, Л.Л. Громашевской, А.Л. Гураля. - Киев, 2004. - 120 с.
6. Варшигора А.Ю. Імунологія / А.Ю.Варшигора. - Київ: Вища школа, 2005. - 736 с.
7. Принципи, особливості та застосування гібридомної технології / І.В.Ніколаєнко, Л.М.Шинкаренко, О.Ю.Галкін [та ін.] // Імунологія та алергологія. - 2003. - № 4. - С. 7-17.
8. Goding J. Monoсlonal antibodies. Principles and practice/ J.Goding. - San Diego: Acedemic press, 1996. - 492 р.
9. Harlow E. Antibodies. A laboratory manual / E.Harlow, D.Lane. - N.-Y.: Cold Spring Harbor, 1988. - 726 p.
10. Одержання нових моноклональних антитіл до імуноглобулінів людини класу G, придатних для використання у діагностиці інфекційних захворювань // О.Ю.Галкін, І.В.Ніколаєнко, Г.Є.Раєвська [та ін.] // Мікробіологічний журнал. - 2005. - Т. 67, № 6. - С. 40 - 48.
11. Новые моноклональные антитела к HBs-антигену / И.В.Николаенко, Г.Е.Раевская, И.Г.Костенко [и др.] // Вирусный гепатит В - диагностика, лечение и профилактика (к 40-летию открытия HBsAg) : Российская научно-практическая конференция с международным участием, 19 - 20 мая 2004 г. : тезисы докладов. - М.: Гепатитинфо, 2004. - С. 131 - 132.
12. Johnstone A. Immunochemistry in practice / A.Johnstone, R.Thorpe. Oxford: Blackwell, 1982. - 380 р.
13. Preparation of highly purified human IgG, IgM, and IgA for immunization and immunoanalysis / I.V.Nikolayenko, O.Yu.Galkin, N.S.Grabchenko [e.a.] // Ukrainica Bioorganica Acta. - 2005. - Vol. 2, № 2. - P. 3 - 11.
14. Kohler G. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity / G.Kohler, C.Milstein // Nature. - 1975. - Vol. 256. - P. 495 - 497.
15. Lane D. Molecular recognition and the future of monoclonal antibodies / D.Lane, H.Koprowski // Nature. - 1982. - Vol. 296. - P. 200 - 202.
16. Изучение аффинности естественных антител сыворотки крови человека к компоненту клеточной стенки бактерий - глюкозамилмурамилдипептиду, обладающей адъювантной активностью / А.В.Кулаков, С.В.Климова, Д.А.Ярилин [и др.] // Иммунология. - 1997. - № 1. - С. 21 - 24.
17. Tijssen P. Practice and theory of enzyme immunoassays / P.Tijssen // Lab. Techiques in Biochem. and Molecular Biology. - 1985. - Vol. 15. - P. 674.
18. Моноклональные антитела к подклассам IgG человека: получение и исследование специфичности / В.Б.Климович, М.П.Самойловим, И.Ю.Крутецкая [и др.] // Иммунология. - 1998. - № 3. - С. 27 - 31.
19. Evaluation of thirty-one mouse monoclonal antibodies to human IgG epitopes / C.Reimer, D.Phillips, C.Aloisio [e.a.] // Hybridoma. - 1984. - Vol. 3, № 3. - P. 263 - 275.
20. Пособие по лабораторной диагностике ВИЧ-инфекции/СПИДа / В.Н.Гирин, И.В.Дзюблик, В.Г.Порохницкий, А.Л.Гураль [и др.]. - Киев: Медпроминфо, 1999. - 140 с.
|
